《鬼泣5》的故事发生在前作多年后，主角依然是尼禄，但是他的“恶魔右手”被神秘人物砍了，所以我们看到的是一个带着机械义肢的尼禄。为尼禄制作机械义肢的是本作新角色，武器职人妮可，一位带有疯狂科学家属性的姑娘。尼禄和妮可将在本作中结伴解决恶魔事件——城市中出现了巨大的树，它的树根会像触手一样攻击人类，其他各种恶魔也在到处肆虐。恶魔猎人将让这些怪物再次哭泣，然后，夺回原本属于他的东西。